批量测试引物的网站，检测引物是如何设计的
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1、在线设计引物网站有哪些-如何快速设计shRNA
要进行shRNA载体构建，首先需要根据自己的基因，设计出对应的 靶点 、 loop序列 ， 酶切位点序列 ，详见 LncRNA的shRNA慢病毒载体引物设计 - 引物先用10000g在4°离心2min，再按照说明书的要求，加入DEPC或者无酶ddH2O将寡核苷酸稀释为100 μM。
基因研究中，敲除基因，研究该基因的功能是最常用的套路。一般 ShRNA 可通过 RNA 干扰来抑制基因的表达， 是基因研究中必不可少的环节。下面就主要围绕设计 ShRNA 引物序列，手把手教你构建 ShRNA 质粒，轻松敲基因。
没有书籍。自己上google搜索这些PCR设计的关键字，看几篇文献就好了。百度文库里就有很多，你先看看普及下基础。
首先是实验设计 详情见：CRISPR-Cas9基因敲除sgRNA设计 https：//www.jianshu.com/p/8222f449cb44 sgRNA的合成和投递有两种方式：A）PCR；B）单独的sgRNA的表达质粒。A）PCR扩增的方法 U6：来源于人U6小核启动子，常用小RNA 表达，转录本为shRNA。
有趣的是，除了短双链RNA，短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA），比如茎环结构在细胞内经过加工后也可以变成siRNA，从而产生RNA干扰（7）。这使得构建表达干扰RNA的载体，从而使哺乳动物细胞内基因表达长期沉默成为可能（8）。
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